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2002年，因主演个人首部影视作品《大唐歌飞》正式出道，马苏在剧中饰演“大唐歌妃”许合子。2003年6月，与吴奇隆、李绮红合作出演武侠剧《丝路豪侠》；随后，她在唐辉执导的青春剧《夏日里的春天》中饰演加拿大留学生李春天；此外，她还主演了民国爱情剧《爱在有情天》，在剧中饰演温婉古典的孙秀冬。
2004年8月16日，其主演的现代爱情剧《我的功夫女友》播出；同年，她还与黄磊、王劲松等人合作主演了都市情感剧《后海前街》，在剧中饰演外科医生文新。2005年，马苏与窦智孔、黄圣依合作联袂主演了金庸武侠剧《碧血剑》，并在剧中饰演袁承志的青梅竹马安小慧；随后，她还主演了战争剧《东江特遣队》，在剧中饰演抗日女战士林亚珍。
2006年5月11日，与焦恩俊、吴京等人合作主演的古装武侠剧《武当Ⅱ》播出，在剧中饰演鄂王郡主朱婉；随后，她在胡明凯执导的古装剧《吴越钱王》中饰演绝美山姑甄珠凤；8月9日，其主演的古装剧《红墨坊》在上海东方电影频道首播，她在剧中饰演乌之鹏的女儿乌梅，从小与靳开文青梅竹马一起长大。
2007年，主演庞好执导的现代剧《睁开你的眼睛》，在剧中饰演现代派女孩齐小璇；此外，她还主演了古装剧《清风明月佳人》。2008年1月28日，与保剑锋、陈紫函合作主演的情感剧《善良背后》在安徽卫视播出，在剧中饰演罪犯的女儿蓝欣；随后，她还出演了尹力执导的故事片《铁人》。
2009年，凭借电视剧《道德底线》提名南方盛典年度影视颁奖礼最具人气女演员；同年2月18日，她与夏雨、闫妮合作主演的现代剧《北风那个吹》播出，在剧中饰演的性格极端、爱嫉妒、反复无常的刘青，她凭借该角色获得第15届上海电视节最具潜力女演员奖；此外，她还与钱泳辰、潘虹合作主演了家庭伦理剧《夺子战争》，并在剧中饰演钢镚儿的苦情母亲陈秀；12月，马苏在主演的古装剧《瑞莲》中饰演女主角瑞莲；随后，参与录制中国电视艺术委员会为纪念飞天奖30周年特别策划、制作的电视专题节目《飞天传奇》。
2010年，主演李舒执导的剿匪剧《大西南剿匪记》，在剧中饰演女土匪郑幺妹，这也是马苏首次挑战女土匪形象；8月14日，她与黄海波、李明启主演的励志剧《我的美丽人生》在央视一套播出，马苏在剧中饰演聪明、厚道，真诚、善良的女主角王小早；同年，马苏凭借故事片《铁人》获得第19届金鸡百花电影节最佳女配角提名。
2011年4月23日，与王志文、李幼斌合作主演的谍战剧《旗袍》播出，这是马苏首次出演谍战剧，其在剧中饰演的女主角关萍露，代号“旗袍”，是位聪明勇敢，才貌双全的中共情报人员，而她也凭借该剧获得了包括华鼎奖革命题材最佳女演员在内的多个奖项；随后，她还主演了女性励志剧《女人如花》，在剧中饰演天生丽质，能歌善舞却又命运多舛的厂花白玉萍；同年，马苏还参演了中日建交四十周年的献礼电影《通往明日之爱》，并在片中饰演一位中方企业的负责人，直接掌管日方方案的生死大权；而她也因此受邀出席了第二十四届东京国际电影节；该片则于随后在电影节的特别展映单元中进行超前展映年。
2012年1月23日，其主演的古装神话喜剧《春光灿烂之欢乐元帅》在深圳卫视播出；4月2日，与李小璐、任重等人合作主演的家庭情感剧《AA制生活》在湖南卫视播出，马苏在剧中饰演家庭富裕、执着单纯的蔡娟；随后，她还主演了都市情感剧《小夫妻时代》；8月16日，主演的都市情感剧《北京青年》播出，在剧中饰演聪明细心，坚韧不拔、洒脱果敢的大嫂权筝，马苏凭借该剧获得第三届乐视影视盛典“年度电视剧最具影响力艺人”奖；9月14日，与吴奇隆搭档主演的古装武侠剧《新白发魔女传》在湖南卫视首播，其在剧中饰演的白发魔女练霓裳，天性良善却被冠之鬼魔之名，豪爽、痴情，身上又有着叛逆和反抗精神；同年，除了与徐峥、张歆艺合作主演都市情感剧《大男当婚》，并在剧中饰演倍具争议的物质女蔡微澜；她还凭借《女人如花》获得第二十六届中国电视金鹰奖观众最喜爱的女演员奖；此外，马苏还在宁海强执导的抗战剧《中国骑兵》中饰演了地主家女儿罗娟子；12月，她相继获得华鼎奖中国偶像励志题材最佳女演员奖、国剧盛典年度电视剧人物等多个奖项。
2013年4月24日，马苏在福布斯中国名人榜上位列第46位，年收入3040万元，收入排名为49位；6月29日，主演的情感剧《烈焰">烈焰》在河北卫视播出，在剧中马苏饰演受尽生活磨难的苦命女孩宋雨；此外，她还主演了都市情感剧《三十岁，你好》；随后，在其主演的都市情感剧《今夜天使降临》中饰演80后的北漂田甜；12月26日，马苏凭借在电视剧《女人如花》和《北京青年》中的表现，获得第29届中国电视剧飞天奖优秀女演员奖，从而成为了该奖项的首位80后得主。
2014年5月4日，马苏在福布斯中国名人榜上位列第76位，年收入1850万元，收入排名75位；7月11日，与沙溢合作主演的都市时尚轻喜剧《结婚前规则》在北京卫视、四川卫视、云南卫视播出；之后，出演古装爱情剧《美人制造》；9月30日，与众多艺人共同主演的公路爱情喜剧片《心花路放》上映，她在片中饰演泼辣火爆的东北妹儿莎莎，该影片票房于10月16日突破10亿，其个人也凭借该片获得第十届中美电影节最佳女配角奖、第二届伦敦国际华语电影节最佳女配角奖；10月23日，凭借《北京青年》获得第十届全国十佳电视制片十佳电视剧演员奖；12月，主演当代都市剧《团圆饭》，在剧中饰演宋一达青梅竹马的恋人白丽娟。
2015年3月4日，在中央电视台元宵晚会上表演舞蹈《国色天香》；3月28日，主演都市情感剧《天使的城》；4月30日，其出演的都市情感电影《何以笙箫默》上映；5月11日，马苏在福布斯中文版发布的福布斯中国名人榜上位列第84位；8月，作为嘉宾参加户外美食真人秀节目《十二道锋味第二季》的拍摄，与羽泉、陈伟霆同是锋味家族成员，同时她还为节目演唱了主题曲《回甘》；随后，其与李晨、沙溢合作主演的抗战剧《秀才遇到兵》播出，她在剧中饰演戏班当家花旦、性格果敢泼辣的万山红；10月18日，受邀出席第十届罗马电影节；同年，出演的古装剧《芈月传》播出，马苏在剧中饰演不择手段，挑拨离间的魏国公主魏琰。
2016年2月15日，其主演的都市情感剧《还是夫妻》在央视一套播出，马苏在剧中饰演设计师林筱；同年，出席米兰秋冬时装周及巴黎秋冬时装周；随后，她主演的历史战争片《大轰炸》和奇幻治愈系电影《28岁未成年》相继上映；之后，她又与高云翔合作主演都市爱情剧《爱情没有暂住证》，在剧中饰演萧佟的情侣左心妍。
2017年，与范冰冰、高云翔合作主演古装传奇剧《巴清传》，在剧中饰演巴清的姐妹巴红香；5月18日，马苏获得中国当代题材电视剧最佳女演员奖；随后，参演的美食剧《深夜食堂》之花好月圆单元播出；之后，参演霍建起执导的都市爱情片《如影随心》。
2018年5月9日，马苏携影片《如影随心》亮相戛纳国际电影节开幕式；8月27日，主演现代都市喜剧电影《同学烩》在北京怀柔中影基地正式开机。
2019年4月19日，主演的爱情电影《如影随心》在全国上映，马苏在片中饰演中文老师刘娟；5月29日，主演的电影《老虎》在延边举办开机发布会，马苏在片中饰演女警察尚飞；6月1日，主演的奇幻喜剧题材影片《遇神》在成都开机；9月10日，主演的乡村题材电视剧《绿水青山带笑颜》开机；12月31日，参加2020环球跨年冰雪盛典晚会，马苏与关喆倾情合唱了歌曲《全世界都在说东北话》。
2002年釜山亚运会后，马苏和身为哈尔滨同乡的乒乓王子孔令辉相识相恋。2013年7月23日，在电视剧《今夜天使降临》发布会上，马苏承认与孔令辉分手。
2007年，零片酬出演儿童公益慈善电影《缘来是爱》。2009年，马苏作为志愿者投身公益活动《5.12中国·爱——中国娇子爱心行动》，帮助震区百姓实现心愿。2011年5月19日，马苏出席在扬州大剧院举办的第二届大爱之城大型公益慈善晚会，并与刘敏、刘欢、画家江源等人一同为晚会进行义演。
2012年9月12日，出席芭莎明星慈善夜十周年庆典，与赵宝刚导演代表北京青年剧组积极响应公益号召，为慈善出钱出力；12月2日，受邀参加善行天下第五届首都慈善晚会。
2013年4月16日，出席Morellato2013春夏新品发布会暨微笑行动慈善捐赠活动；随后，马苏获得由共青团中央、新浪微博、爱地球携手主办的全国大学生绿植领养活动的全国推广大使称号；4月20日，雅安地震发生后，正在剧组赶拍戏的马苏随即通过中华思源工程扶贫基金会华谊兄弟公益基金向灾区捐款10万元，并第一时间联系到身处四川的影迷，送上暖暖祝福；8月18日，出席免费午餐爱心公益典礼，并参与慈善拍卖与演出环节。2015年6月26日，马苏参加特别一步·智擅至美——中国路跑群英汇暨特美的心公益慈善跑项目启动仪式。
2016年1月31日，马苏作为爱心形象大使，出席了由导演杨文军在感恩节发起的公益项目一米阳光的专项基金启动仪式，随后马苏亲自拍得了两幅画作，为一米阳光公益项目献出了自己的爱心；9月1日，与李云迪化身爱心大使前往西藏海拔5373上的一所小学——普玛江塘小学，用一场与众不同的直播助力爱心西藏行公益活动；11月29日，与黄渤、胡歌、佟丽娅等出席中国文学艺术界联合会第十次全国代表大会。2017年9月9日，出席芭莎明星慈善夜。
2019年5月28日，亮相参与第八届“国际艾滋病反歧视午餐日”并获“梦想老师”称号。
影视奖项
综合奖项
作品奖项
2014年的马苏称得上是电视界的拼命三娘，对每一个角色都认真揣摩钻研，用细腻生动的表演诠释人物形象，给观众留下了深刻的印象。而在生活中的她自认为是“女汉子”热情、开朗、自信，用微笑感染着身边的人。
马苏以张弛有度的表演游走于古典与现代之间。她拥有靓丽的外表，帅气的姿态，从古装风格到都市风情，她的表演大气、成熟、令人赞叹。出生在东北冰城哈尔滨的马苏，有着一张古典精致的面孔，看上去像江南水乡的女孩，骨子里却有着一股执拗、好强的劲儿。
马苏有着活泼鲜明的性格，好强外向，直来直去的脾气，既温暖又体贴，还很会为他人着想。马苏是一个非常认真、努力、好学的演员，一个能把自己完全融入角色的好演员，很能带动对手。戏里戏外都魅力十足，是一个潜力无限女演员。
2018年1月17日，李某曾在其微博账号中发布涉嫌严重侮辱诽谤马苏的博文和文章，马苏随后提起诉讼；5月10日，该案在北京市朝阳区人民法院开庭审理；6月26日，马苏一审胜诉，北京市朝阳区人民法院责令李某连续7日在其新浪微博首页置顶发表致歉声明向马苏赔礼道歉，并赔偿马苏经济损失及精神损害抚慰金共3.5万元；7月9日，李某在其微博上公开致歉，承认其之前所发文章是为了蹭热度、博眼球而人为捏造的，并附一张手写致歉信。