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1995年，参演首部电视剧《传奇人生》，正式进入娱乐圈。1996年，参演由孙伟执导的古装悬疑剧《狄仁杰断案传奇》，在剧中饰演碧珠；同年，参演张华勋执导的古装武侠剧《隋唐演义》，在剧中饰演小翠。
2000年2月，与吴健、曹荣共同主演古装神话剧《西游记后传》，在剧中饰演善良耿直的白莲花。2002年6月，与吴奇隆、朱茵共同主演古装武侠剧《萧十一郎》，在剧中饰演聪明直率、风情万种的风四娘。11月，参客串出演由胡意涓执导的年代家庭剧《女人汤》，在剧中饰演林汤头的母亲。2003年5月，客串出演由黎文彦执导的科幻剧《少年王》，在剧中饰演银月村长杜鹃。2004年4月，参演由袁立、胡兵主演的爱情年代剧《啼笑因缘》，在剧中饰演江湖女子关绣姑。6月，出演由陈国峰执导的古装武侠剧《丝路豪侠》，在剧中饰演野心勃勃的咒奴罗汉百花。
2005年，参演由车凯颂执导的古装传奇剧《大清洗冤录》，在剧中饰演歌女杨桃花。8月，参演由何润东、安以轩主演的近代武侠剧《中华英雄》，在剧中饰演姬丝。12月，参演由梦继执导的都市生活剧《网事情缘》，在剧中饰演李云。2006年4月，与吴奇隆、杜德伟共同主演现代励志剧《铁拳浪子》，在剧中饰演性格温柔、坚强的蓝静。10月，参演由李威执导的当代校园剧《女生日记》，在剧中饰演温柔漂亮的班主任罗老师。2007年3月，主演由李威执导的现代情感剧《爱了散了》，在剧中饰演手段狠毒、内心曲折的乔煜。4月，与杜淳、刘恺威共同主演年代苦情剧《换子成龙》，在剧中饰演外柔内刚、真诚坚强的赵玉华。10月，主演年代苦情剧《顺娘》，饰演自强不息的“断掌女人”陈顺英。
2008年6月，主演由杨玄执导的年代爱情剧《宁为女人》，在剧中饰演自强不息的周慧君。12月，主演由陈伟祥执导的爱情伦理剧《牌坊下的女人》，在剧中饰演单纯善良的方瑾。2009年4月，参演由邓超、李小冉主演的军旅抗战剧《军医》，在剧中饰演单纯贤惠、温柔体贴的郭二妹。10月，与贾乃亮共同主演年代传奇剧《春桃的战争》，在剧中饰演美丽善良的春桃。12月，参演由白楠执导的现代情感剧《娘家的故事》，在剧中饰演聪慧灵巧的何小西，收视率获得同时段全国冠军。
2010年6月，与刘恺威共同主演民国爱情剧《谁知女人心》，在剧中饰演善良纯朴的刘琦真。9月，与陈思诚共同主演民国爱情剧《大丫鬟》，在剧中饰演个性坚忍不拔的桑采青，并凭借此剧获得金南方影视盛典最具人气女演员奖。2011年1月，与杨明娜共同主演爱情偶像剧《爱情有点蓝》，在剧中饰演天资聪颖、秉性善良的宋立欣。3月，与王斑共同主演都市爱情剧《裸婚》，在剧中饰演特例独行、我行我素的林菲。6月，主演由杨玄执导的家庭伦理剧《良家妇女》，饰演淳朴温婉、坚韧善良的周若云。10月，主演由毛尉光的现代家庭剧《娘家的故事3》，在剧中继续饰演何小西；同月，主演由陈伟祥的近代传奇剧《郎本无情》，在剧中饰演张若颜。
2012年6月，与高云翔共同主演家族情感剧《锁梦楼》，在剧中饰演身世凄苦、刚毅泼辣的金凤。10月，参演由朱翊执导的刑侦悬疑剧《步步杀机》，在剧中饰演评弹艺人齐清梅。2013年3月，与斌子共同主演家庭情感剧《幸福绽放》，在剧中饰演善解人意却又坚韧不拔的祁雯。6月，与任天野共同主演民国悬疑剧《娘心》，饰演宽容善良的张彩霞。2014年3月，主演由虎子执导的战争剧《枪火》，在剧中饰演正直勇敢、个性鲜明的马舒。
2016年5月，与何赛飞、杨婷婷共同主演现代家庭剧《娘家的故事4》，在剧中继续饰演何小西。9月，与于晓光、王千源共同主演的战争历史剧《英雄烈》开机。2017年3月，参加明星育儿观察类真人秀节目《妈妈是超人第二季》。2018年9月，参演的都市情感剧《只为遇见你》杀青，在剧中饰演手腕过人的穆子昀。2019年1月，参演的的古装武侠电视剧《天龙八部》开机，在剧中饰演李青萝。
2001年，马雅舒和台湾艺人吴奇隆通过拍摄电视剧《萧十一郎》时相识。2006年12月，吴奇隆与马雅舒结束5年的恋爱，在云南登记结婚。2009年8月11日，马雅舒与吴奇隆正式办理离婚手续。
2010年6月27日，马雅舒与罗伯特在昆明结婚。2013年5月，马雅舒被曝光怀孕已有三个月。2013年11月，马雅舒在中国香港产下一女。2015年2月，马雅舒在香港剖腹生子。
《大丫鬟》和《谁知女人心》两部剧的相继播出，让马雅舒在演艺圈的辨识度逐渐高升。戏曲科班出身的她，将此类传统悲情大戏拿捏得既有深度又有宽度，也再度奠定了她在“女人戏”中的绝对主角地位。马雅舒也很敏感，偶尔多愁善感，但却乐观、豁达、执著，特别是对事业，有着一股子顽强和热情。提及“桑采青”、“春桃”、“何小西”等几个角色，收看过着几部作品的观众们无不对其留下了深刻的印象，而马雅舒的完美诠释也让自己名声见长。不论说《春桃的战争》以及《娘家的故事》，马雅舒以自己独特的人物表现手法征服了大批的观众们，她对人物性格的细腻诠释也赢了了不少好口碑。凭借自己精湛的演技，马雅舒在《大丫鬟》中饰演的“苦情丫鬟”桑采青的悲惨遭遇和频繁的悲戏场面始终牵动了观众们的心。而在电视剧《爱了散了》中，马雅舒以自己对角色的深切体会融入到了表演中间，将一个做了错事的人的无奈与挣扎表现得如此淋漓尽致。